Что показывает игх. Иммуногистохимическая диагностика рецепторного статуса рака молочной железы (PR, ER, ki67, Her2 neu)

Иммуногистохимическое исследование в онкологии – это разновидность исследования ткани с помощью специальных реактивов по принципу антиген-антитело .

При используются реактивы, которые содержат антитела, отмеченные специальными веществами.

Антитело – это белок, который связывается в тканях с определенными молекулами - антигенами, после чего возникает реакция. Если же таких молекул нет, то и реакции не будет.

По этому признаку можно судить, присутствует в ткани интересная нам молекула или нет. Это похоже на то, если нанести на белый стол бесцветный клей. Невооруженным глазом на белом фоне он практически незаметен, но стоит насыпать на стол мелкого песка, как клей становится виден за счет прилипших песчинок.

По правилам иммуногистохимическое исследование при раке всегда проводится в специализированной лаборатории. Для его проведения необходима опухолевая ткань, полученная в результате или операции.

Иммуногистохимическое исследование проводится для определения наличия в опухолевых клетках различных точек приложения, например, наличие рецепторов эстрогенов (ER) и прогестеронов (PR). Также иммуногистохимия выполняется для определения показателя Ki-67 (индекс пролиферативной активности опухолевых клеток), гиперэкспрессии белка Her2neu, VEGF (сосудистый фактор роста), р53.

Иммуногистохимическое исследование при раке выполняется для того, чтобы понять, какими препаратами можно лечить злокачественную опухоль, и к каким видам препаратов она чувствительна.

Самый распространённый анализ, определяемый при иммуногистохимическом исследовании , это наличие рецепторной чувствительности к гормонам у опухоли.

1. ER / PR (Эстрогеновые и прогестероновые рецепторы, ER- еstrogen receptor, PR-progesterone receptor)

ER и PR - протеиновые рецепторы на поверхности опухолевых клеток.

В организме человека постоянно вырабатываются гормоны - эстроген и прогестерон. Эти гормоны воздействуют на ER и PR рецепторы, что приводит к стимуляции роста опухолевых клеток.

Определение Эстрогеновых и Прогетестероновых рецепторов является одним из важнейших моментов, определяющих чувствительность опухоли к терапии гормональными препаратами.

Чаще всего наличие рецепторов ER/PR определяют при . Их наличие дает возможность, помимо стандартных методов лечения, применить гормональную терапию .

При гормон позитивном раке молочной железы, назначаются препараты: Тамосксифен, Экземестан (Аромазин), Летрозол (Фемара), Анастразол (Аримидекс), Гексэстрол (Синестрол) и другие.Также, считается, что гормонально-зависимый рак молочной железы отличается спокойным течением и редким .

Чувствительность опухолевых клеток к гормональной терапии выражается в баллах от 0 до 10 . Опухоль считается гормонозависимой, начиная с 2-х баллов. и требует добавления к лечению гормональной терапии.

2. Her2Neu (от англ. Human Epidermal Growth Factor Receptor 2)

Her2Neu - это рецептор эпидермального фактора роста раковой клетки. Это - ген, который воздействует на мембранные рецепторы клетки, и стимулирует её к усиленному делению.

В некоторых опухолях (чаще всего , ) присутствует гиперэкспрессия (повышенная активность) Her2Neu , что вызывает быстрое деление опухолевой клетки и её повышенную активность.

Также снижается эффективность , гормональной терапии . Из-за этого опухоли с Her2neu позитивным статусом отличаются агрессивным течением.

Существует две методики определения наличия у опухоли гена Her2neu:

Результаты иммуногистохимического исследования выражаются в баллах:

• 0-1 означает, что опухоль без гиперэкспрессии Her2neu.
• 3 означает, что опухоль с гиперэкспрессией Her2neu.

2. Метод FISH (Флуоресцентная гибридизация in situ)

В отличие от иммуногистохимического исследования, при котором определяются белки, при методе FISH определяется наличие генов, кодирующих протеины Her2neu. В зависимости от их наличия, определяется гиперэкспрессия Her2neu .

Определение гиперэкспрессии рецептора Her2neu в опухоли молочной железы является очень важным для дальнейшего назначения лечения.

В современной онкологии гиперэкспрессию Her2neu определяют, чтобы понять, необходимо ли добавление к лечению ингибиторов Her2neu. Для лечения опухолей с гиперэкспрессией рецептора Her2Neu активно и успешно используются Трастузумаб (Герцептин), Пертузумаб (Перьета), Трастузумаб-эмтанзин (Кадсила), Бейодайм (Трастузумаб+Пертузумаб) . Эти препараты прицельно блокируют рецепторы Her2neu, тем самым останавливая активный рост опухолевых клеток и повышая их чувствительность к химиопрепаратам. Добавление таргетной терапии к стандартной химиотерапии при лечении Her2neu позитивных опухолей, серьезно увеличивает общую выживаемость и результат противоопухолевого лечения.

3. Ki-67

Ki-67 - это маркер пролиферативной активности опухолевой клетки. Данный параметр оценивается в процентах и показывает, сколько процентов опухолевых клеток активно делятся.

Если Ki-67 меньше 15%, опухоль считается слабоагрессивной, при показателе Ki-67 от 30 до 50% опухоль считается агрессивной, а при показателе Ki-67 выше 50% опухоль является высокоагрессивной.

Также Ki-67 является фактором прогноза течения опухолевого заболевания и ответа опухоли на химиотерапевтическое лечение. Определяется это простым способом: чем ниже показатель Ki-67 , тем хуже опухоль реагирует на химиотерапевтическое лечение . И наоборот - чем выше показатель Ki-67 , тем лучше опухоль будет отвечать на химиотерапию.

4. Белок p53

Белок p53 - это транскрипционный фактор, регулирующий клеточный цикл. В быстро делящихся клетках обнаружено увеличение концентрации белка р53 по сравнению с клетками, делящимися медленно, что обусловлено высоким риском их онкогенности.

Белок p53 предотвращает образование злокачественных опухолей в нашем организме. В норме, антионкоген р53 находится в неактивном состоянии, а при появлении повреждений ДНК в здоровой клетке - активируется.

Функция белка р53 состоит в удалении тех клеток, которые являются потенциально онкогенными. Это называется - индуцированный апоптоз, уничтожение потенциально опасной клетки.

При иммуногистохимическом исследовании, повышенное содержание белка p53 обнаруживается в 50% злокачественных клеток, что позволяет им беспрепятственно делиться и избегать апоптоза (уничтожения).

Количество белка p53 , определяют в дополнение к показателю Кi67, для того, чтобы понять насколько агрессивна опухоль и определить дальнейшее течение болезни. Если уровень белка p53 высокий, значит опухоль не агрессивная и не склонна к метастазированию и быстрому росту. Если же, показатель белка p53 низкий, то значит опухоль агрессивна и склонна к быстрому росту в окружающие ткани и метастазированию .

5. VEGF (Фактор роста эндотелия сосудов)

VEGF – это сигнальный белок, вырабатываемый клетками для активного роста новых сосудов в уже существующей сосудистой системе.

Есть несколько видов белка VEGF, и каждый воздействует на определенный рецептор VEGFR (Vascular endothelial growth factor receptor). Для того чтобы активно делиться, опухоли нужно питание, а для этого нужны сосуды, по которым это питание будет поступать. Именно по этой причине в опухолевых клетках содержится повышенное содержание белка VEGF - для того, чтобы в короткие сроки строить сосудистые сети.

Наличие белка VEGF в опухоли говорит о возможности применения такими препаратами, как Бевацизумаб (Авастин), Рамуцирумаб (Цирамза), Афлиберцепт (Залтрап). Они перестраивают сосудистую сеть опухоли, тем самым лишая её питания.

6. Определение экспрессии белков PD-1, PDL-1 и PDL-2

Для того чтобы отобрать пациентов, которым показана иммунотерапия, проводится определение наличия экспрессии PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2, при помощи флюоресцентной гибридизации in situ (FISH) . При наличии экспрессии PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2, показано применение иммунотерапии препаратами Пембролизумаб (Кейтруда), Ниволумаб (Опдиво), Атезолизумаб (Тецентрик).

В современной онкологии иммуногистохимическое исследование играет очень важную роль, так как при помощи этого исследования онкологи определяют наличие тех или иных факторов в опухоли, которые позволяют грамотно и адекватно составить дальнейшее лечение пациента и говорить о прогнозах заболевания.

Альтернативные названия: ИГХ, англ.: Immunohistochemistry или IHC.

Иммуногистохимическое исследование - особый метод диагностики опухолевых заболеваний. Суть метода заключается в изучении под микроскопом образов тканей, предварительно обработанных специфическими антителами.

В настоящее время созданы антитела практически ко всем опухолям.

С помощью иммуногистохимического исследования выполняется:

Показания для иммуногистохимического исследования

С помощью этого метода можно исследовать любые ткани. Главным показанием к проведению является подозрение на опухолевый процесс.

Определены следующие показания для ИГХ:

Противопоказания

К данному методу исследований нет противопоказаний. Его проведение невозможно лишь в том случае, если нет возможности получить биопсийный материал.

Как проводится иммуногистохимическое исследование

Само исследование состоит из четырех этапов:

Результаты исследования становятся известны через 7 дней (при стандартном исследовании – «малая панель») или через 15 (расширенное исследование – «большая панель»).

Интерпретация результатов

Изучением образцов занимается врач-патологоанатом, прошедший специальную подготовку по ИГХ. В заключении врач отмечает, к каким антителам определена тропность (сродство) ткани. Дополнительно описывается морфологическая структура образца – какие клетки и в каком количестве присутствуют.

Выявление сродства ткани к определенным стандартным опухолевым антителам свидетельствует о конкретном виде онкологического заболевания.

Дополнительная информация

Иммуногистохимическое исследование в настоящее время является наиболее точным методом диагностики опухолевых заболеваний. Оно позволяет с точностью до 99% поставить окончательный диагноз, определить вид опухоли, выявить ее первичную локализацию.

Литература:

Онкологические заболевания бывают самой страшной явью для абсолютного большинства людей. Но чтобы вовремя выявить серьезную проблему и начать от нее эффективно избавляться, необходимо проводить специальные обследования. Одно из них - ИГХ- исследование.

Гены, рецепторы и факторы роста

Точные причины, которые заставляют клетки активно делиться, образуя новообразования, зачастую имеющие онкологическую направленность, науке до сих пор неизвестны. Но вот то, как происходит рост клеток, уже достаточно хорошо изучено. Клетки тканей имеют сложную структуру. На поверхности клетки есть так называемые HER-2 -рецепторы. Они служат своеобразными антеннами, слушающими команды организма. Кстати, аббревиатура HER-2 берет начало от английского словосочетания human epidermal growth factor receptor 2 , что в дословном переводе значит "рецептор человеческого Эти-то рецепторы и заставляют клетку делиться, расти или самовосстанавливаться.

Активная работа рецептора и опухоль

К сожалению, не всегда организм человека работает так, как должно быть в идеале, без сбоев и болезней. Пока наука точно не знает, почему, но случается так, что HER-2 -рецепторы начинают активно получать команды "делиться и размножаться". А так как эти клеточные элементы очень исполнительные, то они заставляют клетки активно делиться, образуя опухоль. Только медицинские обследования, в том числе и ИГХ-исследование, позволяют определить статус новообразования, а также прогноз для лечения и жизни пациента.

Генный статус опухоли

Онкологические образования современной медициной определятся по статусу влияния гормональной терапии. может быть отрицательным (негативным) и Конкретизировать характер новообразования помогает ИГХ-исследование. Что показывает иммуногистохимия? Данное исследование помогает установить гормональную зависимость новообразования - герцепт-статус, а значит, правильно выбрать методику лечения, чтобы получить действенный результат.

Негатив и позитив

То, что гормональный герцепт-статус опухоли носит названия "положительный" или "отрицательный", много расскажет грамотному врачу. Но вот сами по себе эти определения не относятся к эмоциям, как может подумать простой обыватель, впервые услышавший об ИХГ-исследовании. Выявленный положительный герцепт-статус говорит о том, что этот тип онкологического заболевания имеет более агрессивный характер, он быстрее развивается, распространяясь по организму путем метастазирования. Но в то же время такая злокачественная опухоль с высоким уровнем вероятности откликнется на определенные виды лекарственных препаратов. Отрицательный герцепт-статус новообразования расскажет, что опухоль развивается медленно, но вот адекватного медикаментозного лечения для нее пока что нет.

Иммуногистохимия - что это?

Одно из самых распространенных онкозаболеваний среди женщин - рак молочной железы. ИГХ-исследование помогает определить тип новообразования и подобрать лечение в соответствии со сложившейся ситуацией. Иммуногистохимия - это биоптата (биоматериала, взятого в процессе биопсии) при помощи специального окрашивающего вещества. Это вещество окрашивает HER-2 -рецепторы, и чем больше рецепторов, влияющих на появление и развитие "ненормальной" клетки, тем ярче будет окраска исследуемого биоматериала.

Как определяется статус новообразования?

Окрашенный биоматериал во время лабораторного исследования на определение герцепт-статуса подвергается визуальному исследованию. для этого прилагается специальная шкала, имеющая градиентную окраску от 0 до 3+. Этот способ позволяет различить 4 основных порога, в зависимости от которых предполагается вести больного дальше. Кажется - что проще? Окрасить исследуемые ткани при помощи специального вещества, разместить под микроскопом, тщательно рассмотреть, сравнивая увиденное с контрольными цветными образцами, и установить герцепт-статус опухоли. Но здесь огромную роль играет человеческий фактор, особенности освещения и так далее.

Как проводится ИГХ-исследование

При подозрении на онкологическое заболевание проводится исследование молочной железы. Расшифровка содержит всего четыре порога. Но проблема в том, что средние два значения, а это будет 1+ и 2+ по шкале, предполагают неясный результат, требующий дополнительного исследования другим методом. То есть ИГХ-исследование - наиболее неоднозначный метод выявления герцепт-статуса новообразования. К тому же на результат исследования активно влияют, как уже упоминалось, человеческий фактор и внешние обстоятельства. Единственное, что наиболее точно определяются два крайних результата - отрицательный 0 (новообразование имеет отрицательный герцепт-статус) и 3+ (гормональный статус опухоли положительный).

Женские гормоны и опухоли

Как говорит современная медицина, большинство опухолей женской половой сферы являются зависимыми от гормонального уровня организма. На их развитие активно влияют женские половые гормоны - прогестерон и эстроген. Рецепторы к этим гормонам определяют образование и развитие онкозаболевания. Установленная гормональная зависимость позволяет достаточно четко определить схему лечения с последующими жизненным прогнозом. К тому же эти рецепторы играют свою роль не только в онкологических заболеваниях молочных желез, но и в таких серьезных проблемах, как женское бесплодие, эндометриоз и раковые болезни половой сферы - матки, яичников, шейки матки. Герцепт-статус опухоли, который устанавливается во время ИГХ-исследование эндометрия, например, позволит назначить лечение именно теми препаратами, которые помогут добиться адекватного результата без излишних экспериментов с подбором лекарственных средств в каждом конкретном случае.

Если бесплодие

Бесплодие - огромная проблема для многих современных семей. Проведенные научными медицинскими учреждениями исследования показали, что в достаточно большом количестве случаев бесплодие бывает обусловлено недостатком гормонального фона эндометрия - эпителиального слоя, выстилающего полость матки. Именно герцепт-статус и позволяет выявить ИГХ-исследование рецептивности эндометрия. Женские половые гормоны - активные участки процесса формирования яйцеклетки, ее оплодотворения, имплантации эмбриона в полость матки, а также последующего вынашивания беременности и родов. ИХГ-исследование эндометрия, как мы уже сказали, позволяет выявить герцепт-статус клеток эндометрия к эстрогену и прогестерону и в соответствии с полученными результатами подобрать для женщины правильное лечение.

Диагностика лимфомы

Онкологические заболевания - беда человечества. Хотя современная фармакология и технические разработки позволяют излечиваться от этих болезней. Но здесь очень важна диагностика, особенно на ранних стадиях заболевания. Онкология лимфы - достаточно распространенная беда. ИГХ-исследование при лимфоме - один из способов поставить точный диагноз, чтобы затем назначить адекватную терапию. Данное исследование проводится на биоптате лимфатической жидкости или ткани системы кроветворения. Взятый для исследования материал подвергается окрашиванию специальным веществами, помогающими определять онкомаркеры. К сожалению, этот вид исследования несовершенен и в большинстве случаев дополняется другими методами диагностики. К тому же часто не сама лимфатическая система становится причиной проблемы. Именно это и позволяет выявить ИГХ-исследование лимфы.

ИГХ-анализ - своевременное знание

Проблемы со здоровьем должны быть вовремя обнаружены и идентифицированы. Для этого-то и нужны всевозможные методы обследований, анализы. ИГХ- исследование - один из наиболее распространенных методов диагностики новообразований или других проблем с тканями различных органов. Исследование ИГХ проводится на взятом для определения проблемы материале - так называемом биоптате. Материал окрашивается специальными веществами для каждой конкретной цели, и с помощью визуального сравнения, проводимого врачом-гистологом, устанавливаются онкомаркеры, показывающие ту или иную проблему. Несовершенство иммуногистохимического исследования состоит в том, что материала может быть недостаточно, сыграет свою роль человеческий фактор, или же внешние причины не позволят установить точную картину проблемы. В любом случае для адекватной диагностики заболевания, тем более онкологического, необходимо проводить целый комплекс обследований, где одной из ступеней будет ИГХ- исследование. Что это такое при раке какого-ибо органа, ткани? Биоптат исследуется на онкомаркеры, позволяющие оценить их наличие в образце. Как помощь в постановке диагноза ИГХ-исследование незаменимо, также оно активно используется в установлении причин женского бесплодия.

Медицина, и диагностическая в том числе, постоянно развивается. Возможно, в ближайшем будущем иммуногистохимическое исследование будет доведено до совершенства и позволит многим людям поставить адекватный диагноз с наименьшими затратами времени и сил.

Иногда результатов гистологии бывает недостаточно. Если не удается получить окончательный ответ и поставить диагноз или необходимо уточнение молекулярных параметров опухолевого образования назначается иммуногистохимическое исследование.

Что это такое

Метод иммуногистохимии используют как дополнительный. Он помогает выявить в биологическом материале специфичные белки, которые характерны для определенного вида клеток и, как следствие, отличить одну разновидность опухолевого образования от другой. Также исследование помогает выявить:

1. Маркеры иммуногистохимии, которые отвечают за чувствительность опухоли к воздействию лекарственных средств, лучевой терапии.
2. Метастатический характер происхождения образования и определить первичный источник поражения.
3. Гормоны и рецепторы к ним.
4. Малигнизацию клеток.

ИГХ как метод диагностики широко применяется в онкологии. Этот вид изучения тканей предполагает применение определенных реактивов. Они содержат в себе антитела или белковые соединения, которые помечены определенными веществами.

ВАЖНО! Антитела (иммуноглобулины, специфические белки) вырабатываются различными клетками организма и обеспечивают иммунитет, при внедрении антигена. Часто вырабатываются при попадании вирусов, бактерий, при онкологии, вакцинации, пересадке тканей, а иногда и против собственных клеток, что приводит к аутоиммунным патологиям. Получают их от различных животных. [>

При контакте с антигенами, которые могут содержаться в исследуемом биоптате, происходит специфическая реакция (антигенами являются межклеточные вещества ткани, компоненты клеточных структур). В результате нее можно судить о наличии или отсутствии того или иного вещества в тканях.

ВАЖНО! Антигены - генетически чужеродное тело, которое при попадании в организм вызывает иммунную реакцию, а именно выработку антител для подавления этого чужеродного агента. В случае с ИГХ-анализом антигенами выступают молекулы, которые вырабатываются патологически измененными опухолевыми клетками.

Структурная специфичность исследования - принципиально отличает ИГХ от других способов иммунологической диагностики, которые используют реакцию антиген-антитело. Т. е. специалисты оценивают помимо присутствия тех или иных веществ в тканях (при наличии или отсутствии окрашивания) и их количественный состав (по интенсивности окрашивания), еще пространственное распределение различных структурных элементов (цитоплазма, ядро, мембрана клетки и пр.) в тонком окрашенном срезе.

Способы проведения исследования

Реакцию можно получить несколькими способами. Часто применяется прямой, при котором используется один вид маркированных антител. Последние должны связаться с выявляемым веществом или молекулой-мишенью. Если последняя присутствует в биоптате, то исследуемая ткань окрашивается.

Непрямой метод считается более информативным и чувствительным. Его суть заключается в поэтапном введении 2 разных антител. Немаркированные первичные антитела вступают в реакцию с опухолевым антигеном в биоптате, образуют комплекс антитело-антиген. Затем вводят вторичные уже маркированные антитела (реагент), которые связываются с определенной частью молекулы первичного антитела. Т. е. первичные антитела являются антигенами для вторичных.

Когда назначается исследование?

ИГХ назначается в том случае, когда обычного гистологического исследования недостаточно. Например, когда опухоль молочной железы имеет неспецифичное микроскопическое строение, не позволяющее поставить точный окончательный диагноз.

Что показывает

Биопсия с иммуногистохимией являются важной частью верификации диагноза при раке молочной железы, предстательной железы, мягких тканей и пр. Особенно актуально исследование для выявления лимфом, поскольку зачастую диагностировать эту болезнь без ИГХ невозможно. Большую роль ИГХ исследование играет в определении гистологического типа недифференцированных опухолевых образований, а также метастазов, которые имеют невыясненный первичный очаг.

Иммуногистохимия рака молочной железы полезна в прогнозировании течения опухолевого процесса и возможности таргентной терапии. Она помогает оценить:

• функциональное состояние клеток образования;
• злокачественный потенциал и темп роста опухоли;
• тенденцию к метастазированию.

Как делается анализ?

Чтобы провести исследование, необходимы образцы самой опухоли и близлежащих тканей. Их можно получить при биопсии или после хирургического вмешательства. Материалу необходимо пройти несколько этапов подготовки перед исследованием: фиксация, промывание, обезвоживание, погружение в парафин или заливка другим веществом.

Исследуемый биологический объект должен получиться плотным, но не хрупким. Сначала материал промывают, обезвоживают и уплотняют в спиртах возрастающей крепости. Затем его просветляют путем погружения в смесь абсолютного спирта и О-ксилола в пропорции 1:1. После этого помещают в несколько порций чистого О-ксилола. И только потом биологический объект пропитывают в парафине. Последний этап помогает законсервировать ткань и на долгое время сохранить ее структурные особенности в парафиновом блоке.

Затем лаборант производит с этих блоков срезы, при помощи специального прибора - микротома, толщиной до 1 мкм. Полученные срезы наклеивают на предметное стекло, которое смазано глицерином и смесью белка. Подсушивают.

Чтобы исследуемый материал вступил в реакцию с антителом, необходимо его обезжирить и удалить парафин. Процедура называется депарафинизация. Для ее проведения используют 3 порции О-ксилола, а также спирты нисходящей крепости.

Последний этап - окрашивание. Оно проводится для того, чтобы четко видеть структуру тканей под микроскопом. Лаборанты могут использовать огромное количество красителей. Условно их можно классифицировать по:

• происхождению, например, животные - кармин, растительные - гематоксилин, синтетические - эозин;
• химическим свойствам, например, нейтральные, основные, кислые.

Чаще всего для этой процедур используют эозин, гематоксилин. Биологический материал помещают в раствор гематоксилина на несколько минут, затем промывают и дифференцируют результаты окрашивания. После этого провидится окрашивание в эозине, промывание и обезвоживание в спиртах восходящей крепости. Последовательная многоэтапная окраска позволяет на каждом этапе все больше определить нозологию и фенотип опухолевого образования. Патоморфолог изучает материл под микроскопом после каждого окрашивания. И только после оценки изменений и интерпретации полученной информации, назначает панель антител.

Чтобы получить точные данные о патологическом процессе и верифицировать заболевание лаборант приступает к обработке подготовленного образца специальными реактивами, содержащими меченые антитела. В результате происходит реакция между антителом и антигеном. Это сопровождается характерной визуализацией, которая зависит от веществ, используемых для маркировки.

Что означают результаты?

Иммуногистохимия молочной железы - это сложный многоступенчатый анализ, на результат которого влияет множество факторов, например, низкое качество реагентов, недостаточная фиксация исследуемого биологического объекта или неправильно подобранная панель антител. Количество искомых клеток-мишеней исчисляется сотнями, поэтому специалист должен понимать, что он ищет и использовать для этого необходимые антитела.

Гистологи оценивают интенсивность окрашивания опухолевых клеток после взаимодействия с реактивами по специальной шкале:

• 0-1+ - онкологии нет;
• 2+ - онкологическое образование отрицательное;
• 3+ - онкологическое образование положительное.

Длительность ИГХ при раке молочной железы во многом зависит от способа его проведения. Бывает ручной и автоматический. Последний считается более совершенным, поскольку вероятность технической ошибки сведена к минимуму, да и проводится он гораздо быстрее.

Перед определением тактики лечения онколог задается различными вопросами: какова вероятность рецидива заболевания у больного или его смерти, какой результат лечения можно ожидать. Для этого специалист изучает особенности и характеристики опухоли и в зависимости от различных предсказывающих и прогностических факторов назначает тактику лечения.

Прогностические факторы

К этим факторам относятся основополагающие признаки, которые определяют особенность протекания болезни и ее исход. При операбельных формах онкологии груди к таким факторам относятся: морфологическое строение и его размер, состояние лимфоузлов. Т. е. подобные характеристики определяют хронологию болезни.

Особенности прогностических факторов:

1. Базируются на биологических характеристиках опухолевого образования.
2. Взаимосвязаны с продолжительностью жизни пациента в независимости от тактики терапии.
3. Делят пациентов по степени риска смерти, рецидива.
4. Примеры: индекс митотической активности, протеолитические ферменты, антиогенез и др.

Индекс митотической активности (MAI) является независимым прогностическим фактором, который характеризует продолжительность жизни больных. У пациентов с индексом меньше 10 в процессе наблюдения летальный исход составлял 6 %, у пациентов с индексом больше 10 - 28 %.

Протеолитические ферменты имеют значение в процессе метастазирования. В трансформированных злокачественных клетках таких ферментов вырабатывается больше, чем в здоровых, поэтому при злокачественных образованиях наблюдается выход этих веществ в межклеточное пространство и увеличение активности. Т. е. ферменты вовлечены в процесс онкогенеза. Т. о. пациенты с низким уровнем этих ферментов имеют более благоприятный прогноз по безрецидивной выживаемости.

Способность новообразования расти и метастазировать во многом зависит от ангиогенеза - образования новых кровеносных сосудов. В процессе наблюдения пациентов в течение 10 лет, было выявлено, что у женщин с высоким значением плотности микрососудов в опухоли прогноз хуже.

Предсказывающие факторы

Эти факторы предсказывают эффективность лечения. Они помогают выделить группу пациентов с более-менее значимым ответом на проводимую терапию. К примеру, опреелить эффективность гормональных препаратов, уровень рецепторов стероидных гормонов.

К клиническим факторам, которые помогают интерпретировать ответ на терапию при метастатической форме рака относятся:

1. Локализация и количественный показатель метастазов. Например, при поражении кости - прогноз относительно благоприятный; поражение кости, 2 органов, легких - менее благоприятный; при поражении больше 2 органов, наличии метастаз в печени, мозгу и пр. - неблагоприятный.
2. Временной интервал между лечением первичного новообразования и появления метастазов. Чем он продолжительнее, тем благоприятнее прогноз.
3. Общее состояние здоровья пациента.
4. Возрастная категория. Женщины в постменопаузе имеют больше шансов на благоприятный ответ на терапию.
5. Рецепторы стероидных гормонов в опухоли (гормононезависимые новообразования не реагируют на гормональное лечение).

Метастатический рак молочных желез считается хронической патологией. После полного регресса, полученного в результате химиотерапии, продолжительность жизни 5-10 лет встречается достаточно редко, примерно в 5-20 % случаев. Поэтому для лечения считается оптимальным вариантом - последовательное применение лечебных воздействий с как можно меньшей токсичностью, чтобы получить максимальный паллиативный эффект и отсрочить прогрессирование патологии, смерти.

Достоверность результатов ИГХ молочной железы достигает 99 %. Методика чувствительна и высокоспецифичная. Она помогает верифицировать патологический процесс и установить стадию заболевания. Для ее проведения необходимо минимум биоптата и реактивов, при этом она будет информативна даже спустя длительное время после взятия биопсии.

Онкологические заболевания грудных желез диагностируются у женщин довольно часто. Поэтому диагностические мероприятия, позволяющие обнаружить опасную опухоль, не теряют актуальность. Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы предназначено для определения восприимчивости злокачественных клеток к конкретным веществам. Посредством исследования выясняют, корректно ли осуществляемое лечение.

ИГХ – что это за исследование?

Применяемое в онкологии иммуногистохимическое исследование позволяет обнаружить взаимосвязь между белками, синтезируемыми злокачественными клетками, и антигенами. Выявив эту связь, специалисты устанавливают вид и структуру новообразования.

Цель исследования

ИГХ при онкологических патологиях грудных желез осуществляют, чтобы:

• установить вид заболевания, восприимчивый к определенной терапии;
• , пущенные опухолью, и степень их распространения;
• найти источник метастазов;
• установить стадию развития выявленной опухоли;
• оценить действенность терапии;
• узнать скорость распространения метастазов;
• выявить чувствительность кровяных клеток к конкретным лекарственным веществам для отсеивания неэффективных медикаментов.

Показания к ИГХ

Диагностическое исследование применяется для определения состояния любой части человеческого организма. Назначают процедуру не только при раке грудных желез, но и при любых новообразованиях, предположительно являющихся злокачественными. Посредством ИГХ определяют состояние эндометрия при:

• появлении метастазов;
• патологиях матки;
• бесплодии;
• неудачных процедурах ЭКО;
• болезнях органов тазовой области, имеющих разную этиологию;
• постоянном самопроизвольном прерывании беременности.

Противопоказаний к проведению процедуры нет. Отказываются от исследования, только если по каким-либо причинам у пациента невозможно взять биоматериал.

Подготовка к исследованию

Перед процедурой пациентка:

• не должна принимать гормональные лекарства (за неделю до взятия биоматериала);
• не должна принимать медикаменты для остановки крови;
• должна провести тщательные гигиенические процедуры.

Исследование проводят в конкретные дни менструального цикла:

• на 5 – 7 день изучают патологические изменения эндометрия;
• на 20 – 24 день оценивают секреторную и рецепторную деятельность.

Ход исследования

Для проведения иммуногистохимического теста методом биопсии забирают некоторое количество опухолевой ткани грудной железы. Забор осуществляется на участке, где специалист подозревает скопление злокачественных клеток.

Перед процедурой медик отмечает выбранную точку на груди пациентки. Также на анализ могут взять куски опухоли , вырезанные при хирургическом вмешательстве.

1. Собранный биоматериал относят в лабораторию.
2. Опухолевые образцы опускают в емкость с формалином.
3. Биоматериал обезжиривают.
4. Вливают парафиновую жидкость, позволяющую определить структуру и вид опухолевых тканей.
5. Отрезают кусок опухоли толщиной 1 мм.
6. Кладут на лабораторное стекло.
7. В качестве красителей используют химические реагенты и антитела.
8. Итоги теста готовы спустя две недели.

Для обнаружения рака молочных желез берут разные маркеры. Если по итогам теста выявлено наличие в опухолевых тканях значительного количества женских половых гормонов, то опухоль активно развивается. Возможно даже, что уже пошли метастазы. Если скопление гормонов среднее, то злокачественные клетки размножаются неактивно. А значит, при грамотном и своевременном лечении у пациентки есть возможность восстановить здоровье.

Положительный итог гормонального лечения возможен, если маркер Ki-67 при злокачественной опухоли молочной железы не превышает 15 – 17%. Новообразование стремительно растет, если маркер достигает 35%. В этой ситуации незамедлительно осуществляется химиотерапия, позволяющая затормозить размножение злокачественных клеток. Если же маркер выше 85%, то проводить лечение уже поздно, смертельный исход неизбежен.

Расшифровка результатов

Расшифровывая результаты, смотрят на прогестероновые (PR) и эстрогеновые (ER) рецепторы. При ИГХ также определяют количество рецептора человеческого эпидермального фактора роста (белок HER-2) во взятом у пациентки биоматериале. При злокачественной опухоли молочной железы HER-2 повышен.

При повышенном ER и PR в опухолевых тканях можно говорить, что злокачественное образование растет под воздействием гормонов. Если концентрация ER и PR не выходит за пределы нормы или выходит незначительно, то пациентка может надеяться на успешное лечение.

Расшифровывают показатели ИГХ по специальной цветовой шкале, соотнося цвета на шкале с оттенками биоматериала.

1. 0 и +1. Концентрация белка соответствует норме. Терапевтические мероприятия не нужны.
2. +2. Концентрация белка средняя. В грудной железе присутствует злокачественная опухоль. Обычно проводят дополнительное исследование, чтобы подтвердить верный результат первого теста. Дополнительное исследование называется FISH, позволяет узнать содержание белка в каждой клетке. Если HER-2 в норме, то FISH-тест даст положительный результат, если повышен, то отрицательный.
3. +3. Концентрация белка намного выше нормального значения. Однозначно в грудной железе присутствует злокачественное новообразование.

Если тест показал высокую концентрацию белка, то опухоль агрессивного типа, растет интенсивно.

По результатам ИГХ выделяют 4 вида рака груди:

• – рецепторы ER положительны, рецепторы к белку отрицательны, Ki-67 ниже 14%;
• Б-люминальный – рецепторы ER и HER-2 отрицательны, Ki-67 выше 15%;
• сверхэкспрессирующий – рецепторы ER и PR отрицательны, рецепторы к белку положительны;
• базальноподобный – все рецепторы отрицательны.

Прогностические маркеры

По ним определяют наиболее вероятное поведение новообразования на момент проведения теста. Нет влияния терапии на исследование. Тест позволяет определить агрессивность опухоли. Прогноз важен для подбора наиболее подходящих медикаментов и лечебных процедур.

Диагностические маркеры

Исследование показывает действенность проводимого лечения. Если обнаружено наличие агрессивного рака, то назначают химиотерапию.

ИГХ – сложный тест, при котором используют большое количество Чем больше маркеров проверяют, тем выше стоимость исследования. Тест эффективен в определении вида онкологического заболевания, помогает назначить оптимальную терапию.