Анализ на определение группы крови RapidVet-H. Переливание крови у кошек и собак

ГРУППЫ КРОВИ У СОБАК

В последнее время вопрос о переливании крови собакам приобрел большое практическое значение. Разведение высокоценных животных и их использование в охоте на крупного зверя или как бойцовых собак стимулировало детальное изучение групповых факторов у собак с целью подбора доноров для собак, потерявших большие количества крови.

На данный период времени у собак описаны 11 систем групп крови, которые обозначают или цифрами от 1 до 11, или латинскими буквами (А, Тг, В, С, D, FJ, К, L, M, N).

Наиболее распространена среди собак 1-я группа крови (или группа А). По оценке специалистов около 60% собак имеют именно эту группу крови. При однократном (первом у реципиента) переливании крови группа А пригодна в качестве донорской крови, практически, для всех собак. Однако, у А-отрицательных реципиентов в ответ на переливание А-положительной донорской крови развивается реакция сенсибилизации. Потому, повторное переливание крови по этой схеме недопустимо из-за развивающейся в этом случае у реципиента гиперчувствительности 2-го типа, которая может привести к гибели собаки.

Поскольку подбор донора для реципиента с А-негативным статусом проблематичен, то можно считать, что успешное повторное переливание крови на практике невозможно.

КРОВООБРАЩЕНИЕ

Кровь выполняет все свои многообразные функции только при условии ее постоянного движения по кровеносным сосудам.

Основной причиной движения крови по кровеносной системе является разница давления крови в начале кругов кровообращения и в конце кругов кровообращения. По законам физики, кровь, как и любая другая жидкость, течет из области высокого давления в область более низкого давления. В пределах большого круга кровообращения это выглядит следующим образом (рис. 34): в аорте на выходе крови из левого желудочка давление крови максимально и составляет 180 мм рт. ст., в капиллярах, через стенки которых происходит обмен веществ между кровью и остальными тканями организма, давление равно 10 - 20 мм рт. ст., а в конце круга кровообращения - в полых венах - давление минимально и равно нулю.

Разницу давления создают несколько факторов. Прежде всего это сердце. Сердце влияет на величину кровяного давления двояко. Во-первых, оно работает как нагнетательный насос при сокра-

Рис. 34. Изменение величины давления крови при ее движении

по большому кругу при физической нагрузке собаки

1- аорта; 2 - средние артерии; 3 - мелкие артерии; 4 - артериолы; 5 - капилляры; 6 - венулы; 7 - средние вены; 8 -полые вены

щении (систоле) желудочков с силой выбрасывая кровь в кровеносное русло (в нашем примере в аорту) и повышая давление крови на стенки сосудов. Однако, это влияние сердца угасает в капиллярной сети.

Во-вторых, сердце при расслаблении (диастоле) работает как присасывающий кровь насос. Расслабляясь, сердечная мышца создает в сердечных полостях некоторое разряжение, что приводит к падению давления крови на стенки полых вен до нуля и обеспечивает заполнение кровью предсердий, а затем желудочков.

Кроме сердца на движение крови в венах влияют сокращения скелетных мышц, т. к. вены, как правило, располагаются в непосредственной близости от них. При движении мышцы сокращаются и оказывают давление на вены, из которых кровь в этом участке выдавливается. А так как вены имеют кармашковые (полулунные) клапаны, регулирующие направление кровотока, то кровь при мышечных сокращениях из вен выдавливается только в сторону сердца.

Венозному кровотоку в полых венах, помогают и дыхательные движения грудной клетки, так как в фазе вдоха в плевральной полости развивается пониженное давление, способствующее насасыванию крови в полые вены.

Таким образом, сердце представляется главным органом, обеспечивающим движение крови по сосудам. Поэтому контроль за сердечной деятельностью является важным элементом контроля за физиологическим состоянием собаки в целом.

В норме сердце работает ритмично в три фазы: систола (сокращение), диастола (расслабление) и пауза. Частота, с которой сердце сокращается у собак, сильно зависит от породной принадлежности, а точнее от величины животного. Так у крупных пород (доги, мастино, сенбернар, кавказская овчарка, ризеншнауцер и пр.) частота сердечных сокращений составляет в покое 60 - 80 ударов в минуту. Для средних собак (миттельшнауцер, фокстерьер, керриблютерьер и пр.) за норму можно принять частоту в 70-100 ударов в минуту. А у мелких собак (болонки, карликовый пинчер, цвиргшнауцер и пр.) сердце даже в покое сокращается с частотой 100-140 ударов в минуту. Поэтому, категоричных указаний на этот счет делать не следует. Для каждой собаки надо определить ее физиологическую норму. Для этого нужно пальпировать область грудной клетки в пределах 4 - 6 ребра и грудной кости с левой стороны в момент отдыха животного в нормальных для него температурных условиях. В этом месте сердечный толчок ощущается практически у всех собак независимо от их размеров, оброслости или физиологического состояния. При затрудненной пальпации можно прослушать сердце при помощи фонендоскопа.

Естественно, что при физических нагрузках частота сокращений сердца возрастает и может состалять 200% от того значения, которое регистрируется в состоянии покоя. Существенно возрастает частота сердечных сокращений летом в сильную жару у собак с развитым шерстным покровом (немецкая овчарка, нестриженные шнауцеры, ньюфаундленды и др.). Поэтому, большие физические нагрузки в это время не всегда полезны животным. Прежде всего это относится к старым и ожиревшим животным. В очень сильную жару, для того,

Волокна Пуркинье (поперечные мышцы сердца)

Рис. 35. Проводящая система сердца

чтобы снять дополнительную нагрузку с сердца, целесообразно провести внеочередную стрижку или триминг собаки, даже если это не входит в клубный план подготовки собаки к выставкам. Все-таки, забота о здоровье вашего друга должна стоять выше плана клубной работы.

Сердце работает ритмично благодаря наличию в нем, так сказать, "генератора" ритма, - или проводящей системы сердца. Проводящая система сердца это собственно часть нервной системы, представленная скоплением специфических клеток, главной задачей которой является генерация спонтанной электрической активности и обеспечение очередности возбуждения предсердий и желудочков. Схематически расположение элементов проводящей системы представлено на рис. 35.

Импульс, дающий начало сердечному циклу, зарождается в узле Кис-Фляка, расположенном в правом предсердии. При этом, происходит возбуждение предсердий и их сокращение. Далее возбуждением охватывается узел Ашов-Тавара на границе предсердий и желудочков, пучок Гиса и волокна Пуркинье. Это сопровождается сокращением желудочков. После некоторой паузы, составляющей доли секунды, возбуждение вновь зарождается в узле Кис-Фляка и сердечный цикл повторяется.

Рис. 36. Электрокардиограмма собаки (схема)

Таким образом, сердце работает, как бы, в автономном режиме. Регулирующие системы организма (нервная и гуморальная) могут лишь изменить частоту возбуждения водителя ритма сердца.

Возбуждение проводящей системы сердца и сокращения сердечной мышцы сопровождаются образованием электрического потенциала, который доходит до поверхностных тканей. Этот потенциал можно зарегистрировать при помощи чувствительных приборов с поверхности тела. Процесс этот известен как электрокардиография. Анализ электрокардиограммы дает специалистам богатую информацию о состоянии сердечно-сосудистой системы (рис. 36, 37).

Принимается во внимание высота, протяженность во времени, форма и периодичность появления каждого зубца (рис. 36). Все это позволяет судить не только о состоянии возбудимости отдельных элементов проводящей системы и сердечной мышцы, но и о работе, выполняемой сердцем.

Техника электрокардиографии универсальна. Биотоки сердца снимаются, как минимум, при помощи трех стандартных отведений по схеме, представленной на рисунке 37.

В последнее время для обследования сердца стали широко применять ультразвуковой метод. Этот метод оценивает линейные размеры сердца, сократимость сердечной мышцы, наличие участков с низкой сократимостью (рубцы), а также производительность сердца как нагнетального насоса (фракция выброса).

Рис. 37. Вид нормальной электрокардиограммы на основных отведениях и схема наложения электродов на теле собаки

В наши дни процедура переливания крови в практике специалистов по мелкодомашним превратилась из экзотики во вполне себе реальную рутину. Состояний, при которых оно требуется, существует великое множество, одного разбора гемолитических анемий хватит на большую отдельную стену текста. Тем не менее вопрос об определении совместимости донорской и реципиентской кровушки по-прежнему вызывает у многих специалистов затруднения, тем более что область эта сложна и не до конца изучена даже в Европах и прочих "прогнивших Западах".

Для начала следует разобраться, что же это такое - группы крови и зачем они нужны. Википедия сообщает нам, что это описание индивидуальных антигенных характеристик эритроцитов, определяемое так-то и так-то. Очень понятно, да? :)

Смысл в том, что организм животных через сложную систему оценки состава поверхностных молекул может (и должен) отличать свои собственные клетки от чужих, кои должны немедленно из организма элиминироваться. Эритроциты разных животных, даже одного вида, к сожалению, также могут отличаться по этим характеристикам. К сожалению - это, конечно, для клиницистов, которым приходится попотеть, чтобы найти совместимых доноров умирающему человеку или животному. При этом белки, определяющие группу крови - это не какие-то специальные белки, которые только для того и нужны, чтобы пощекотать трансфузиологам нервы, а поверхностные мембранные белки, выполняющие свои, не связанные напрямую с иммунной защитой организма, функции.

Общеизвестно, что у человека 4 группы крови. Это тоже не совсем так. 4 группы - только по системе АВО, резус - это уже другая система, которая увеличивает количество возможных вариантов до восьми. Но АВО и резус - это только верхушка айсберга, ибо существуют еще Kell, Kidd, Duffy и другие, о чьем клиническом значении я распространяться не буду.

Вернемся к нашим собакам...

В этих ваших интернетиках часто можно встретить утверждение, что у собак 7 групп крови (и перечисление). Увы, все далеко не так просто и ясно, а скудность информации не делает вопрос проще.

На самом деле перечисление A-G - это перечисление СИСТЕМ групп крови, точнее только один вариант из ныне употребляемых, датируемый аж 1961 годом. С тех пор многие и многие ученые мужи собирались и пытались привести в порядок имеющиеся данные о группах крови у собак, в 1976 году пришли к номенклатуре DEA (dog erythrocyte antigen), которая в данный момент считается общепринятой в США. Согласно это номенклатуре, системы описываются как DEA 1.1, DEA 1.2, DEA 3, DEA 4, DEA 5, DEA 7 и DEA 8. Присовокуплю табличку (см. картинку) из Шалма, очень наглядно объясняющую ху из ху в этой запутанной истории.

И это еще далеко не все варианты, а только те, которые более-менее хорошо изучены.

Система DEA 1

Из них наиболее клинически актуальной является DEA 1. В этой системе 3 пары ген-белок и 4 возможных фенотипа - DEA 1.1, 1.2, 1.3 и 0. У одной собаки возможен только один фенотип. У собак, в отличие от системы АВО человека или АВ кошки, в норме нет антител к антигенам других групп, что означает, что в экстренной ситуации собаке, которую никогда не переливали ранее, можно переливать кровь без определения совместимости по DEA 1.1, и переливание будет иметь необходимый эффект. Однако при необходимости повторного переливания уже возникнут сложности.

Есть вещи, которые надо объяснить подробно и на пальцах, и, увы, система DEA 1.1 в этом списке к простейшим не относится.

При переливании DEA 1-отрицательному реципиенту (фенотип 0) крови DEA 1-положительного донора (фенотип любой кроме 0) организм реципиента через 7-10 суток выработает антитела к антигену DEA 1, которые радостно разрушат любые эритроциты, имеющие на себе этот антиген. В дальнейшем такому реципиенту будет требоваться переливание строго DEA 1-отрицательной крови, в противном случае донорские эритроциты вместо ожидаемых трех недель проживут в организме реципиента от нескольких минут до (в лучшем случае) нескольких часов, сводя целебный эффект гемотрансфузии до 0 и даже уводя его в глубокий минус. При этом DEA 1-положительному донору допустимо переливать кровь DEA 1-отрицательного, при условии что этот самый донор никогда в жизни не был реципиентом.

Пока все понятно? :)

Антиген DEA 1, как уже говорилось, может наличествовать в виде вариантов DEA 1.1, DEA 1.2, DEA 1.3. Генеалогический анализ дает основания предполагать, что DEA 1 имеет аутосомно-доминантный тип наследования, причем DEA 1.1 > DEA 1.2 > DEA 1.3 > 0. Антигрупповые антитела, выработанные невезучим DEA 1-отрицательным донором абзацем выше, дают перекрестную реакцию со всеми тремя вариантами, но различной степени выраженности.

При иммунизации DEA 1-отрицательной собаки кровью DEA 1.1, антитела, которые она выработает, будут мгновенно разрушать эритроциты с DEA 1.1, вызывая острую гемолитическую реакцию, которая, если ее проводить не на стекле, а непосредственно в пациенте, с высокой вероятностью приведет к тяжелым осложнениям. При этом эритроциты с DEA 1.2 и 1.3 эти антитела будут агглютинировать, но не разрушать (хотя с точки зрения полезности для реципиента это немногим лучше).

В России популяционные исследования по группам крови не проводились, но ожидаемо, что процент DEA 1.1, 1.2 и 1.3-положительных собак будет очень сильно варьировать как от региона к региону, так и от породы к породе. В Штатах около 45% собак имеют группу DEA 1.1, 20% DEA 1.2, а DEA 1.3 толком не исследовалась (статистика нагло потырена из того же Шалма). По данным вот этого сайта: https://ahdc.vet.cornell.edu/, большинство грейхаундов DEA 1.1-отрицательны (правда, неясно, что там с DEA 1.2 и 1.3), что добавляет еще один плюс в копилку их положительных качеств как доноров, а лабрадоры - чаще DEA 1.1-положительны.

Помимо острых трансфузионных реакций, в большинстве которых "повинны" антигены группы DEA 1, считается, что у собак также возможен неонатальный изоэритролиз (более, впрочем, характерный для кошек, лошадей и людей ввиду наличия у них групповых антител без предварительной имунизации). Однако как раз из-за отсутствия в норме этих антител случаи считаются скорее спорадическими.

Система DEA 3 (в старой номенклатуре B)

В ней все проще. Собаки могут быть либо DEA 3-положительными, либо отрицательными. При этом у 20% В-отрицательных собак имеются антитела к В, даже при отсутствии предшествовавшей иммунизации несовместимой кровью. В Штатах из популяции всех-всех собак всех-всех пород DEA 3-положительными оказались 6% собак, но в выборке из популяции только грейхаундов DEA 3 имели уже 23% собак. Что еще раз намекает нам на большой разброс статистики по породам.

Переливание DEA 3-положительной крови собаке с соответственными антигрупповыми антителами (своими или приобретенными) вызывает разрущение эритроцитов донора в срок до 5 дней и может стать причиной острых трансфузионных реакций.

Система DEA 4 (С)

Также имеет всего два фенотипа, + и -. Без предварительной иммунизации у DEA-4-отрицательных собак антител к DEA 4 нет. До 98% собак в Штатах DEA 4-положительны, но опять же у нас все может быть совсем не так. Повторное переливание DEA-4-отрицательному реципиенту не вызывает гемолитической реакции даже при наличии антител к DEA 4, однако описан гемолиз у реципиента, которому переливали несовместимую кровь несколько раз подряд.

Система DEA 5 (D)

Два фенотипа, + и -. У 10% DEA 5-отрицательных собак в норме имеются антитела к DEA 5. Переливание крови сенсибилизированному реципиенту вызывает гемолитическую реакцию и гибель донорских эритроцитов в течение 3х суток.

Система DEA 6 (F)

Два фенотипа, + и -. DEA 6-положительные собаки очень распространены (в Штатах до 100%). В норме антитела к этому антигену отсутствуют. Переливание крови сенсибилизированному реципиенту приводит к умеренно выраженной трансфузионной реакции и умеренному снижению продолжительности жизни донорских эритроцитов.

Система DEA 7 (Tr)

Имеет три фенотипа, Tr, O и отрицательный. Антиген Tr имеется у 40-45% собак. Антитела к Tr и О имеются у 25% DEA 7-отрицательных собак, но они не имеют выраженного гемолитического эффекта, а вот при предшествующей сенсибилизации нарабатываются другие, способные разложить донорскую кровь за срок до 3х суток.

Система DEA 8 изучена мало. Кроме вышеперечисленных, существуют еще системы, не включенные в DEA по причине недавности открытия, а также ряд систем, специфичных, к примеру, только для восточных пород собак (шиба-ину и прочие).

Что делать?

Существуют коммерческие диагностические наборы для определения наличия или отсутствия антигенов DEA 1.1, 1.2, 3, 4, 5, и 7. При этом лично я видела в продаже в России только набор для DEA 1.1.

Стоимость определения одного антигена высока - для мегакоровского набора это 1-1,5 тысячи за пробу (это жеж специально подготовленные антитела, нанотехнологии буквально), поэтому в реальной жизни протипировать реципиента и хотя бы одного донора по всем из доступных антигенов - роскошь мало кому доступная. При наличии определенного количества постоянных доноров, имхо, имело бы целесообразность их типировать хотя бы по DEA 1.1, а дальнейшую совместимость определять уже по необходимости биопробой или пробой на индивидуальную совместимость. Это хотя бы позволило отделить собак, несовместимых по группе DEA 1 как наиболее клинически значимой и с наиболее серьезными посттрансфузионными реакциями.

В жизни, особенно в некрупных городах, "готовых" доноров нет, и совместимость определяется "на стекле" между реципиентом и каждым из доноров. Метод прост, нагляден, а главное дешев, однако позволяет исключить только вероятность немедленной трансфузионной реакции, ибо взаимодействие эритроцитов удается отслеживать только в течение 5-10 минут, пока капля не высохнет. Спрогнозировать жизнь перелитой крови на 3-5 суток по такому методу, увы, невозможно, поэтому возможность неэффективности переливания или отдаленных трансфузионных реакций следует всегда иметь в виду.

В наши дни процедура переливания крови в практике специалистов по мелкодомашним превратилась из экзотики во вполне себе реальную рутину. Состояний, при которых оно требуется, существует великое множество, одного разбора гемолитических анемий хватит на большую отдельную стену текста, до которой, возможно, я доберусь попозже. Тем не менее вопрос об определении совместимости донорской и реципиентской кровушки по-прежнему вызывает у многих специалистов затруднения, тем более что область эта сложна и не до конца изучена даже в Европах и прочих "прогнивших Западах".

Для начала следует разобраться, что же это такое - группы крови и зачем они нужны. Википедия сообщает нам, что это описание индивидуальных антигенных характеристик эритроцитов, определяемое так-то и так-то. Очень понятно, да? :)

Смысл в том, что организм животных через сложную систему оценки состава поверхностных молекул может (и должен) отличать свои собственные клетки от чужих, кои должны немедленно из организма элиминироваться. Эритроциты разных животных, даже одного вида, к сожалению, также могут отличаться по этим характеристикам. К сожалению - это, конечно, для клиницистов, которым приходится попотеть, чтобы найти совместимых доноров умирающему человеку или животному. При этом белки, определяющие группу крови - это не какие-то специальные белки, которые только для того и нужны, чтобы пощекотать трансфузиологам нервы, а поверхностные мембранные белки, выполняющие свои, не связанные напрямую с иммунной защитой организма, функции.

Общеизвестно, что у человека 4 группы крови. Это тоже не совсем так. 4 группы - только по системе АВО, резус - это уже другая система, которая увеличивает количество возможных вариантов до восьми. Но АВО и резус - это только верхушка айсберга, ибо существуют еще Kell, Kidd, Duffy и другие , о чьем клиническом значении я распространяться не буду.

Вернемся к нашим баранам собакам и кошкам...

Группы крови собак

В этих ваших интернетиках часто можно встретить утверждение, что у собак 7 групп крови (и перечисление). Увы, все далеко не так просто и ясно, а скудность информации не делает вопрос проще.

На самом деле перечисление A-G - это перечисление СИСТЕМ групп крови, точнее только один вариант из ныне употребляемых, датируемый аж 1961 годом. С тех пор многие и многие ученые мужи собирались и пытались привести в порядок имеющиеся данные о группах крови у собак, в 1976 году пришли к номенклатуре DEA (dog erythrocyte antigen), которая в данный момент считается общепринятой в США. Согласно это номенклатуре, системы описываются как DEA 1.1, DEA 1.2, DEA 3, DEA 4, DEA 5, DEA 7 и DEA 8. Присовокуплю табличку из Шалма, очень наглядно объясняющую ху из ху в этой запутанной истории.

И это еще далеко не все варианты, а только те, которые более-менее хорошо изучены.

Система DEA 1

Из них наиболее клинически актуальной является DEA 1. В этой системе 3 пары ген-белок и 4 возможных фенотипа - DEA 1.1, 1.2, 1.3 и 0. У одной собаки возможен только один фенотип. У собак, в отличие от системы АВО человека или АВ кошки, в норме нет антител к антигенам других групп, что означает, что в экстренной ситуации собаке, которую никогда не переливали ранее, можно переливать кровь без определения совместимости по DEA 1.1, и переливание будет иметь необходимый эффект. Однако при необходимости повторного переливания уже возникнут сложности.

Есть вещи, которые надо объяснить подробно и на пальцах, и, увы, система DEA 1.1 в этом списке к простейшим не относится.

При переливании DEA 1-отрицательному реципиенту (фенотип 0) крови DEA 1-положительного донора (фенотип любой кроме 0) организм реципиента через 7-10 суток выработает антитела к антигену DEA 1, которые радостно разрушат любые эритроциты, имеющие на себе этот антиген. В дальнейшем такому реципиенту будет требоваться переливание строго DEA 1-отрицательной крови, в противном случае донорские эритроциты вместо ожидаемых трех недель проживут в организме реципиента от нескольких минут до (в лучшем случае) нескольких часов, сводя целебный эффект гемотрансфузии до 0 и даже уводя его в глубокий минус. При этом DEA 1-положительному донору допустимо переливать кровь DEA 1-отрицательного, при условии что этот самый донор никогда в жизни не был реципиентом.

Пока все понятно? :)

Антиген DEA 1, как уже говорилось, может наличествовать в виде вариантов DEA 1.1, DEA 1.2, DEA 1.3. Генеалогический анализ дает основания предполагать, что DEA 1 имеет аутосомно-доминантный тип наследования, причем DEA 1.1 > DEA 1.2 > DEA 1.3 > 0. Антигрупповые антитела, выработанные невезучим DEA 1-отрицательным донором абзацем выше, дают перекрестную реакцию со всеми тремя вариантами, но различной степени выраженности.

При иммунизации DEA 1-отрицательной собаки кровью DEA 1.1, антитела, которые она выработает, будут мгновенно разрушать эритроциты с DEA 1.1, вызывая острую гемолитическую реакцию, которая, если ее проводить не на стекле, а непосредственно в пациенте, с высокой вероятностью приведет к тяжелым осложнениям. При этом эритроциты с DEA 1.2 и 1.3 эти антитела будут агглютинировать, но не разрушать (хотя с точки зрения полезности для реципиента это немногим лучше).

В России популяционные исследования по группам крови не проводились, но ожидаемо, что процент DEA 1.1, 1.2 и 1.3-положительных собак будет очень сильно варьировать как от региона к региону, так и от породы к породе. В Штатах около 45% собак имеют группу DEA 1.1, 20% DEA 1.2, а DEA 1.3 толком не исследовалась (статистика нагло потырена из того же Шалма). По данным вот этого сайта , большинство грейхаундов DEA 1.1-отрицательны (правда, неясно, что там с DEA 1.2 и 1.3), что добавляет еще один плюс в копилку их положительных качеств как доноров, а лабрадоры - чаще DEA 1.1-положительны.

Помимо острых трансфузионных реакций, в большинстве которых "повинны" антигены группы DEA 1, считается, что у собак также возможен неонатальный изоэритролиз (более, впрочем, характерный для кошек, лошадей и людей ввиду наличия у них групповых антител без предварительной имунизации). Однако как раз из-за отсутствия в норме этих антител случаи считаются скорее спорадическими.

Система DEA 3 (в старой номенклатуре B)
В ней все проще. Собаки могут быть либо DEA 3-положительными, либо отрицательными. При этом у 20% В-отрицательных собак имеются антитела к В, даже при отсутствии предшествовавшей иммунизации несовместимой кровью. В Штатах из популяции всех-всех собак всех-всех пород DEA 3-положительными оказались 6% собак, но в выборке из популяции только грейхаундов DEA 3 имели уже 23% собак. Что еще раз намекает нам на большой разброс статистики по породам.

(картинка с lindasgreys.com просто чтобы разбавить стену текста. Да и просто люблю грейхаундов)

Переливание DEA 3-положительной крови собаке с соответственными антигрупповыми антителами (своими или приобретенными) вызывает разрущение эритроцитов донора в срок доо 5 дней и может стать причиной острых трансфузионных реакций.

Система DEA 4 (С)
Также имеет всего два фенотипа, + и -. Без предварительной иммунизации у DEA-4-отрицательных собак антител к DEA 4 нет. До 98% собак в Штатах DEA 4-положительны, но опять же у нас все может быть совсем не так. Повторное переливание DEA-4-отрицательному реципиенту не вызывает гемолитической реакции даже при наличии антител к DEA 4, однако описан гемолиз у реципиента, которому переливали несомвестимую кровь несколько раз подряд.

Система DEA 5 (D)
Два фенотипа, + и -. У 10% DEA 5-отрицательных собак в норме имеются антитела к DEA 5. Переливание крови сенсибилизированному реципиенту вызывает гемолитическую реакцию и гибель донорских эритроцитов в течение 3х суток.

Система DEA 6 (F)
Два фенотипа, + и -. DEA 6-положительные собаки очень распространены (в Штатах до 100%). В норме антитела к этому антигену отсутствуют. Переливание крови сенсибилизированному реципиенту приводит к умеренно выраженной трансфузионной реакции и умеренному снижению продолжительности жизни донорских эритроцитов.

Система DEA 7 (Tr)
Имеет три фенотипа, Tr, O и отрицательный. Антиген Tr имеется у 40-45% собак. Антитела к Tr и О имеются у 25% DEA 7-отрицательных собак, но они не имеют выраженного гемолитического эффекта, а вот при предшествующей сенсибилизации нарабатываются другие, способные разложить донорскую кровь за срок до 3х суток.

Система DEA 8 изучена мало. Кроме вышеперечисленных, существуют еще системы, не включенные в DEA по причине недавности открытия, а также ряд систем, специфичных, к примеру, только для восточных пород собак (шиба-ину и прочие).

Что делать?
Существуют коммерческие диагностические наборы для определения наличия или отсутствия антигенов DEA 1.1, 1.2, 3, 4, 5, и 7. При этом лично я видела в продаже в России только набор для DEA 1.1 - вот он:

Стоимость определения одного антигена высока - для мегакоровского набора это 1-1,5 тысячи за пробу (это жеж специально подготовленные антитела, нанотехнологии буквально), поэтому в реальной жизни протипировать реципиента и хотя бы одного донора по всем из доступных антигенов - роскошь мало кому доступная. При наличии определенного количества постоянных доноров, имхо, имело бы целесообразность их типировать хотя бы по DEA 1.1, а дальнейшую совместимость определять уже по необходимости биопробой или пробой на индивидуальную совместимость. Это хотя бы позволило отделить собак, несовместимых по группе DEA 1 как наиболее клинически значимой и с наиболее серьезными посттрансфузионными реакциями.

В жизни, особенно в некрупных городах, "готовых" доноров нет, и совместимость определяется "на стекле" между реципиентом и каждым из доноров. Метод прост, нагляден, а главное дешев, однако позволяет исключить только вероятность немедленной трансфузионной реакции, ибо взаимодействие эритроцитов удается отслеживать только в течение 5-10 минут, пока капля не высохнет. Спрогнозировать жизнь перелитой крови на 3-5 суток по такому методу, увы, невозможно, поэтому возможность неэффективности переливания или отдаленных трансфузионных реакций следует всегда иметь в виду.

А теперь все то же самое, только по кошкам... :3

Группы крови у кошек

У кошек наибольшее распространение и клиническое применение нашла одна-единственная система групп крови AB, по которой определяются 3 антигенных фенотипа - A, B, AB. Фенотипа 0 не существует. Пока что звучит очень похоже на людей (кроме отсутствия группы 0), и на людей кошки похожи еще и тем, что у них с рождения имеются антигрупповые антитела. Это важный факт, поэтому не поленюсь его лишний раз подчеркнуть: кошкам нельзя переливать кровь, несовместимую по группе, даже в первый раз! Доводилось видеть результат бездумной экстраполяции собачьей трансфузиологии на кошачью - результат был эффектен, реципиент не выжил, хотя врачи из нашего отделения ИТ очень старались.

Любопытно, что групповые антигены A и В кодируются в одной аллели и наследуются по Менделю, причем А доминирует над В. То есть, кошка с генотипом А/А имеет группу крови А, кошка с генотипом А/В тоже имеет группу А, и только кошка с В/В будет иметь группу крови В. Вариант группы крови АВ очень редок, молекулярный механизм его существования не до конца изучен, хотя доказано, что это ни кодоминирование, ни химеризм.

У кошек с группой крови А имеется небольшой титр анти-В антител, причем при проведении совмещения "на стекле" с эритроцитами группы В, где-то у двух третей реципиентов А начального титра этих антител не хватит, чтобы вызвать хорошо заметную агглютинацию. При этом у кошек с группой крови В анти-А антитела имеются всегда в высоком титре, поэтому при любом раскладе переливание кошек групп А и В будет иметь весьма и весьма печальные последствия. Кошки с группой АВ не имеют антител ни к А, ни к В и потому являются универсальными реципиентами.

Переливание даже 1 миллилитра крови от донора с группой А вызывает острую и тяжелую трансфузионную реакцию у реципиента с группой В, вплоть до гибели. Жизнь донорских эритроцитов в таком случае исчисляется минутами. Переливание крови группы В реципиенту с группой А вызывает разрушение эритроцитов донора в течение 2 суток, при этом антитела к А, имеющиеся в донорской крови, также не добавляют здоровья реципиенту.

Как и в случае с любыми рецессивными признаками, генотип В/В чаще встречается у чистопородных животных, наиболее часто описан у турецких ван и ангорок, чуть реже у рексов и британских короткошерстных. Подавляющее большинство безродных мурок и васек имеют группу крови А (в разных странах от 70 до 100%).

Неонатальный изоэритролиз

Врожденное наличие антигрупповых антител делает для кошек актуальной еще одну проблему. Как и у всех млекопитающих, кишечник котят в первые несколько суток жизни способен поглощать в неизменном виде материнские антитела (а мать - соответственно выделять их в молозиво). Это особенно актуально для кошек с группой крови В, поскольку титр антигрупповых антител у них выше и шанс их успешного поглощения котятами больше. Котята с группой крови А или АВ в таком случае ощущают на себе все радости трансфузионной реакции, развивающейся уже в первые часы жизни. Н.И. считается наиболее частой причиной "синдрома угасания котят" в неонатальном периоде.

Система Mik
Недавно были описаны случаи несовместимости между кошками с совпадающими группами крови по АВ. Удалось установить, что некий фактор несовместимости не связан с антигенами А и В и, таким образом, является компонентом другой системы, которую назвали Mik, но больше о ней на сегодняшний день мало что известно.

Определение групп крови у кошек
Обязательно даже при первом переливании, желательно при планировании беременности у высокоценных племенных кошек. Существуют (и достаточно распространены) коммерческие наборы вот такого вида:

или такого:

При их отсутствии можно провести определение индивидуальной совместимости, но с оглядкой на "скрытность" некоторых кошек группы А (низкий титр антител делает разрушение эритроцитов донора не мгновенным).

Недавно натыкалась на полемику о возможности-невозможности в экстренных ситуациях переливать кошкам кровь животных других видов. Теоретически звучит заманчиво - антител к эритроцитарным антигенам других видов у кошек точно нет, да и с собаки (а то и человека?) крови можно скачать гораздо больше, чем из донора-кошки, но отсутствие более-менее внятных публикаций на эту тему, наверное, говорит само за себя. То, что не доказано - то не рекомендовано.

В комплексе лечения переливание крови имеет очень важное значение. В клинической практике гемотрансфузии применяют с заместительной целью (перелитые эритроциты находятся в крови реципиента 30-120 дней), стимулирующей целью (действует на различные функции животного организма), с целью улучшения гемодинамики (увеличивается ОЦК, усиливается работа сердца, повышается минутный объем сердца и т.д.), гемостатической целью (переливание крови оказывает стимулирующее действие на систему гемостаза реципиента, вызывая умеренную гиперкоагуляцию, обусловленную увеличением тромбопластической и снижением антикоагулянтной функции крови) (О.К. Гаврилов, 1982).

У собак имеется семь групп крови, определяемых по антигенной принадлежности: А, В, С, D, Е, F и G. Фактор А у животных имеет такое же значение, как и резус-фактор у людей. Этот фактор имеется примерно у 60-65% животных. Повторное переливание крови животному, у которого этого фактора нет, может привести к тяжелым гемотрансфузиологическим последствиям – гемолизу крови и гибели животного.

Первое переливание крови, как правило, не вызывает тяжелых осложнений из-за слабо выраженных антигенных свойств факторов В-G. Однако в некоторых случаях могут наблюдаться аллергические реакции в виде крапивницы, зуда и т.п., которые могут развиться сразу (ранняя реакция) и спустя несколько дней (поздняя реакция). Во избежание этих осложнений необходимо проводить пробы на групповую и индивидуальную совместимость. Для этого необходимо к 1 мл сыворотки реципиента добавить 0,1 мл эритроцитов донора. Реакция производится на стекле при температуре 22-25 0 С. учет осуществляют через 5 минут. При отсутствии агглютинации можно приступать к биологической пробе на индивидуальную совместимость.

Биологическая проба на индивидуальную совместимость проводится путем струйного переливания 10-15 мл крови в течение 3 минут крупным породам собак и 3-5 мл – мелким. Проба проводится трехкратно. При этом у животного, по возможности, измеряется артериальное давление, частота пульса, число дыхательных движений до переливания и через 10-15 минут после струйного введения крови. Беспокойство животного, одышка, тахикардия или аритмия, падение давления, рвота, появление болевых ощущений свидетельствуют о несовместимости переливаемой крови.

При переливании крови следует учитывать, что наиболее подходящей для гемотрансфузии является свежая донорская кровь. Заготовленная заранее кровь уже к 10 дню имеет кислую реакцию (рН до 6,0) и содержит калий в высоких концентрациях (до 8 ммоль/л), что может вызвать аритмию и даже остановку сердца. При переливании заранее заготовленной крови ее необходимо подогревать на водяной бане до температуры 37 0 С, т.к. холодная кровь вызывает гипотермию миокарда, спазм периферических сосудов и ацидоз, легко уходит в кровяное депо. На каждые 200-250 мл цитратной крови вводится 5 мл 10%-ного раствора хлористого кальция, 50 мл 40%-ного раствора глюкозы с 4 ед. инсулина и 20-30 мл 3%-го раствора соды (с целью нейтрализации гиперкалиемии и коррекции ацидоза) (А.А. Бунятян, 1982).

Заготавливая кровь, используют глюгицир (50 мл на 200 мл крови), или следующий состав:

Natrii citrici 2,2%

Ac. citrici 0,8%

Aq. destillatae 94,55%

Такой состав используется в количестве 15 мл на 100 мл крови (М. Закиевич, 1994). Кровь с консервантом можно хранить 21 день при температуре 4 0 С.

Забор крови от животного осуществляется путем венепункции толстой иглой и сливанием ее во флакон с приготовленным консервантом. Для предупреждения коагуляции крови в системе, последнюю необходимо предварительно промыть раствором гепарина или глюгициром, или ввести гепарин донору из расчета 100-200 ед. на 1 кг массы тела. Животному-донору предварительно вводят седативные препараты. Система для взятия крови не должна быть длиннее 25-30 см, т.к. кровь собак склонна к гиперкоагуляции и при большей длине трубки сворачивается в системе. Сосуд для сбора крови необходимо постоянно покачивать с целью перемешивания крови и консерванта.

Без ущерба для здоровья животного можно забирать кровь из расчета 10 мл/кг. Переливают кровь капельно с темпом 40-60 кап/мин из расчета 5-18 мл/кг в час. Повторный забор крови можно производить через 1,5-2 месяца.

При необходимости можно осуществлять заготовку трупной крови (от животных, погибших в результате травм). Заготовка крови в этом случае принципиально не отличается от описанной выше. Если забор крови производить из сердца, можно получить 80-90 мл на кг массы тела. Гепарин в этом случае вводится из расчета 120 ед/кг. Кровь от трупа можно забирать до 6 часов с момента гибели животного.

Для заготовки плазмы используют раствор следующего состава:

Ac. citrici 40.0

Ac. chlorici conc. 7 ml

Aq. destillatae 950 ml

На 900 мл крови добавляют 100 мл этого раствора. Кровь отстаивают в течение 1-2 часов, полученную плазму осторожно переливают в стерильные флаконы и запечатывают. При температуре –15 о С плазму можно сохранять в течение 2 лет. Плазма богата белком, переливание ее показано при острых нарушениях свертываемости крови, гипопротеинемии, интоксикации, для повышения коллоидно-осмотического давления крови.

В повседневной практике врачам довольно часто приходится сталкиваться с проведением различных трансфузиологических операций. Мы остановимся на некоторых из них, имеющих наибольшее значение в лечении больных животных.

Реинфузия крови – переливание крови, излившейся в плевральную или брюшную полости. Реинфузия крови является очень эффективной мерой лечения и предотвращает осложнения, связанные с переливанием донорской крови. Показанием для реинфузии является любая кровопотеря, допускающая использование излившейся в полости (плевральная, брюшная и т.д.) крови. Противопоказаниями являются: гнойное загрязнение излившейся крови, загрязнение излившейся крови мочой или кишечным содержимым, кровотечения, связанные с разрывом матки, почечная недостаточность.

Чаще всего врачу приходится иметь дело с реинфузией крови при разрывах легкого, печени, селезенки, внутрибрюшинных разрывов крупных сосудов. Наиболее простой способ сбора излившейся крови заключается в простом вычерпывании ее из полости ложкой или вымакивания марлей (последний способ значительно хуже, т.к. приводит к существенному разрушению эритроцитов). При сборе крови ее сливают в стерильный флакон с одним из стабилизаторов (глюгицир, цитрат натрия и др.), предварительно профильтровав ее через 4 слоя стерильной марли. После этого флакон закрывают и переливают кровь по обычной методике, осуществляя ее микрофильтрацию через фильтр системы для переливания крови.

Вторым способом забора крови для реинфузии является введение перфорированного трубочного дренажа в брюшную или плевральную полость посредством лапаро- или торакоцентеза. Такой способ позволяет собрать и реинфузировать кровь до оперативного вмешательства, что значительно снижает риск анестезиологического обеспечения, особенно при политравмах, сопровождающихся разрывом паренхиматозных органов и массивной кровопотерей. При эвакуации крови из брюшной полости необходимо убедиться в целостности мочевого пузыря (для этого его необходимо катетеризировать до выполнения лапароцентеза). Небольшие же повреждения кишечника, не сопровождающиеся массивным загрязнением собираемой крови, не являются противопоказанием к ее реинфузии (Е.А. Вагнер с соавт., 1977).

Внутрикостные трансфузии достаточны просты в исполнении, могут использоваться в тех случаях, когда внутривенное введение жидкостей затруднено (гнойные поражения кожи, массивные отеки конечностей и т.д.), а также у щенков и котят. Трансфузии осуществляются внутрикостным введением иглы с мандреном (костномозговая игла Кассирского) в эпифизы костей, крыло подвздошной кости. Перед введением иглы выбривают участок кожи, обрабатывают его как операционное поле (во избежание остеомиелита), прокалывают иглой кожу и подлежащие ткани до кости, затем, преодолевая костный кортикальный слой, получают ощущение "провала" иглы, удаляют мандрен, внутрикостно вводят 0,5-2 мл 2%-го раствора новокаина и проводят инфузию растворов под давлением. По окончании манипуляции кожу обрабатывают йодом и кубатолом.

Аутогемотрансфузия – переливание крови больному животному, взятой у него заблаговременно. Обычно такая необходимость возникает при повторном переливании крови, когда предполагается большая операция с массивной кровопотерей. У животного заблаговременно берут кровь (за 1-2 недели до предполагаемой операции), а затем ее же переливают во время оперативного вмешательства.

Реинфузия асцитической жидкости в сосудистое русло возможна у животных, больных циррозом печени, имеющих выраженный асцит, рефракторный к обычной диуретической терапии. Это позволяет избавиться от большого количества жидкости в брюшной полости, сохранив при этом белок, восстановить его уровень в плазме. Технически это выполняется следующим образом: после пункции брюшной полости асцитическую жидкость собирают в стерильный флакон, и тут же вводят ее внутривенно капельно со скоростью 10 мл/кг в час. За 1 сеанс можно реинфузировать от 10 до 30 мл/кг асцитической жидкости. Такие реинфузии могут проводиться 2-4 раза через 1-2 суток.

При острой кровопотере инфузионно-трансфузионная тактика зависит от количества излившейся крови.

Введение жидкостей должно осуществляться в две вены одновременно с введением крови.

При острых заболеваниях органов брюшной полости (перитонит, острая кишечная непроходимость) инфузионно-трансфузионная терапия должна проводиться в течение 1-2 часов перед оперативным вмешательством. При низком центральном венозном давлении, выраженной тахикардии объем вводимой жидкости может достигать 0,5 мл/кг/мин – в первый час и в дальнейшем зависит от показателя ЦВД. Интенсивная терапия должна продолжаться во время операции и в послеоперацинном периоде. Проведение интенсивной терапии в этих случаях должно быть направлено на устранение гиповолемии, коррекцию водно-электролитного баланса и КОС, дезинтоксикацию, восстановление реологических свойств крови.

У собак определено несколько групп крови. Номенклатура групп крови отражает расхождение мнений нескольких авторов, участвовавших в этих исследованиях, и в настоящее время равнозначно применяются две различные классификации:

DEA = Эритроцитарный Антиген Собаки (напр. DEA 1).

Заглавная буква для системы и строчная отдельная буква для фактора (например, Са). Иногда прибавляется номер для подтипа (напр., Аа1).

Антигены различных групп крови распознаются специфическими антителами в результате прямых или непрямых реакции (т. с. антиглобулинового теста) агглютинации и гемолиза. Некоторые из этих реакций могут проходить только при определенных температурах (напр., 4°С, 25°С или 37°С). Распределение различных групп крови по породам не изучено в деталях, хотя и сообщалось, что грейхаунды имели очень низкую частоту проявления антигенов DEA 1.1 и 1.2 .(Swisher, S. N., Young, L. E., 1991) (таблица).

Очень немногие группы крови определены как значимые для лечения трансфузией, хотя группы DEA 1.1, 1.2 и 7 являются наиболее распространенными антигенными факторами. У собак, как признано, естественно возникающие антитела являются очень редкими и, если они присутствуют в сыворотке, то в низких титрах или вступают в реакцию при температурах, отличных от температуры тела. На самом деле только около 15% собак демонстрируют естественно возникающие антитела к DEA 3, 4, 5 и 7. Появление таких естественно возникающих антител не следует путать с приобретенными антителами к группам крови. Первые не связаны с каким-либо проявлением иммуностимуляции, в то время как при последних имеется мощная иммунная реакция, вызванная, например, переливанием несовместимой крови. Именно вследствие этих иммуногематологических особенностей крайне редко встречается реакция на первую трансфузию при переливании собаке несовместимой крови (Hohenhaus, A. E., Swisher, S. N.,Young, L. E.)

Тем не менее, на практике, по мнению многих авторов (Hohenhaus, A. E., Swisher, S. N.,Young, L. E., Ogilvie, G.K., Moore, A.S.), более простым и удобным методом является проба на совместимость, нежели определение групп крови донора и реципиента.

Таблица. Характеристики групп крови у собак

Выбранный метод; (+) = альтернативный метод; - = нет реакции.

Определение.

Донорская кровь собачья – это кровь, полученная от собаки-донора, консервированная официнальными растворами (цитратом фосфата декстрозы с аденином (CDPA-1), или натрием гидроцитратом двузамещенным с глюкозой в соотношении 2 к 3) и предназначенная для переливания в кровеносное русло собаки-реципиента.

Фармакологические свойства.

Лечебный эффект донорской крови собачьей обусловлен ее стимулирующим, замещающим, гемодинамическим и гемостатическим действием.

Перелитая кровь донорская увеличивает объем циркулирующей крови и поддерживает его на высоком уровне длительное время. Переливание донорской крови собакам с кровопотерей усиливает приток тканевой лимфы в кровеносное русло, что улучшает кровоток. На уровне микроциркуляции происходит расширение артериол и венул, ускоряется ток крови в циркулярной сети. Происходит снижение сброса артериальной системы в венозную. Улучшается кислотно-щелочное равновесие и усиливается потребление кислорода.

Гемостатическое действие крови донорской собачьей обуславливается тем, что перелитая донорская кровь вызывает умеренную гиперкоагуляцию , а также стимулирует систему гемостаза за счет содержащихся в крови биологически активных веществ.

Кровь донорская собачья выполняет в организме кислородно-транспортную функцию, что устраняет гипоксию на органном, тканевом и клеточном уровнях и восстанавливает пострадавшие вследствие анемии функции органов и систем. Введенные вместе с кровью белки циркулируют в организме до 36 суток и включаются в процессы обмена.

Кровь донорская собачья вызывает в организме после ее переливания дезинтоксикационный и трофический эффекты.В результате чего повышается основной обмен, увеличивается дыхательный коэффициент, повышается газообмен, стимулируются белковый и углеводный обмены, улучшается функция иммунной системы (Мокеев И.Н., 1999; Hohenhaus, A. E., 1992; Wingfield, W.E., 1997; Ogilvie, G.K., Moore, A.S., 1995; Stone, M.S., Cotter, S.M., 1992).

Показания к применению.

Основными показаниями к применению крови донорской собачьей являются (Hohenhaus A. E, 1992; Kerl M.E., 1993; Wingfield, W.E., 1997; Stone, M.S., Cotter, S.M., 1992; Kirby R., 1995; Crystal M.A., Cotter S.M., 1992):

Острая кровопотеря.

Острая гемолитическая анемия.

Невосстанавливающаяся анемия с гематокритом между 12 и 15%.

Наследственная или приобретенная коагулопатия.

Тромбоцитопения, тромбоцитопатия.

Лейкопения.

Гипопротеинемия.

Порядок применения.

Кровь донорская собачья применяется для переливания собаке-реципиенту путем внутривенного введения в любые доступные вены. Скорость внутривенной трансфузии цельной крови должна зависеть от клинического состояния реципиента.

В первые 30 минут скорость вливания должна быть около 0,25 мл/кг; нормоволемическим больным кровь следует вводить со скоростью, не превышающей 5 мл крови на кг веса тела каждый час. Этот объем можно осторожно повышать: у гиповолемических особей - до 20 мл/кг/час; в то время как у больных, страдающих сердечно - сосудистой недостаточностью, скорость введения следует снижать до 0,5-1,0 мл/кг /час.

Количество вводимой крови определяется из расчета, что введение 2 мл цельной крови на кг веса тела повышает гематокрит реципиента на 1%.

Внимание! Перед введением крови донорской собачьей реципиенту обязательно должны быть проведены пробы на совместимость (перекрёстная и биологическая пробы).

Проба на совместимость.

Перекрёстная проба (in vitro )

1 этап. Эритроциты донора, промытые 3 раза и взвешенные в физрастворе (1:1), приводятся в контакт с гепаринизированной плазмой или сывороткой крови реципиента (по 1 капле) на предметном стекле или в пробирке. Через 5 минут пробы проверяют на гемолиз и гемагглютинацию.

2 этап. Идентичен предыдущему этапу, но при проведении теста используются эритроциты от реципиента и сыворотка или гепаринизированная плазма от донора. Оценка пробы идентичная.

Перекрестная проба для собак, если позволяет время, должна быть выполнена при трех температурах 4 о С, 25 о С, 37 о С, или, по крайней мере, при 25 о С и при 37 о С.

При проведении пробы в лабораторных условиях мягкое центрифугирование – 1000 G в течение 2 мин после контакта промытых эритроцитов с сывороткой поможет демонстрации гемолиза.

Оценка реакции.

Отрицательная проба: отсутствие гемолиза и гемагглютинации свидетельствует о совместимости крови донора и реципиента. Переливание крови разрешается.

Положительная проба: наличие гемолиза и (или) гемагглютинации в проводимых реакциях свидетельствует о несовместимости крови; переливание в таком случае запрещено (Hohenhaus, A. E., 1992; Wingfield, W.E., 1997; Ogilvie, G.K., Moore, A.S., 1995; Stone, M.S., Cotter, S.M., 1992 Kerl M.E., 1993; Wingfield, W.E., 1997; Stone, M.S., Cotter, S.M., 1992; Kirby R., 1995; Crystal M.A., Cotter S.M., 1992).

Биологическая проба (in vivo).

Биологическую пробу проводят независимо от объема переливаемой крови и скорости ее введения. Проба проводится после отрицательной перекрестной пробы на совместимость

Контейнер с цельной кровью извлекают из холодильника и выдерживают при комнатной температуре в течение 30 мин.

Однократно переливается 10 мл донорской крови собачьей со скоростью 2-3 мл/мин, затем переливание прекращают и в течение 3 минут наблюдают за реципиентом, контролируя у него пульс, дыхание, общее состояние, цвет кожи, измеряют температуру тела.

Такую процедуру проделывают еще дважды. Появление в этот период даже одного из таких клинических симптомов, как озноб, тошнота или рвота, покраснение кожи, требует немедленного прекращения трансфузии и отказа от переливания.

Побочные действия.

Гемолиз. Проявляется редко. Характеризуется подъемом температуры тела, увеличением частоты сердечных сокращений и дыхания, тремором, рвотой, коллапсом. При возникновении гемолиза начинают введение кристаллоидных растворов и контролируют выход мочи.

Лихорадка . Может свидетельствовать о бактериальной контаминации крови или быть связана с антигенами лейкоцитов, ускоряющих высвобождение эндогенных пирогенов. У собак встречается редко.

Аллергические реакции . Проявляются сыпью и ангионевротическим отеком. При обнаружении данных признаков переливание прекращают и вводят глюкокортикоиды.

Токсические эффекты консерванта . Проявляются в виде быстрого снижения концентрации ионизированного кальция. Клинически это состояние характеризуется мышечным тремором, подергиванием лицевых мышц и судорогами. В этом случае трансфузию прекращают и внутривенно вводят глюконат кальция. (Hohenhaus, A. E., 1992; Wingfield, W.E., 1997; Ogilvie, G.K., Moore, A.S., 1995; Stone, M.S., Cotter, S.M., 1992; Kerl M.E., 1993; Wingfield, W.E., 1997; Stone, M.S., Cotter, S.M., 1992; Kirby R., 1995; Crystal M.A., Cotter S.M., 1992).

Нормативные документы на кровь донорскую собачью, включающие качество, требование к качеству, составу и свойствам.

Требования к донорам и качество донорской крови.

При заборе вся кровь, поступающая от донора, должна пройти тщательный анализ.

Прежде всего, оценивается клиническое состояние собаки-донора.

Собака-донор должна соответствовать следующим требованиям:

Вес выше 25 кг

Возраст от 2 до 8 лет

Спокойный характер

Гематокрит выше 45 %

Регулярная вакцинация против основных инфекционных заболеваний

Клинически здорова по результатам осмотра.

Затем, после забора, кровь проходит полное лабораторное исследование:

Гематологическое исследование. Определяется гематокрит, гемоглобин, количество эритроцитов, лейкоцитов, лейкограмма. Гематокрит должен составлять не менее 45 %, все остальные параметры также не должны иметь отклонений от нормы.

Биохимическое исследование. Измеряются основные биохимические показатели: билирубин общий, прямой, АСТ, АЛТ, мочевина, креатинин, общий белок, альбумин, щелочная фосфатаза, амилаза, глюкоза, ЛДГ, ТТГ, КФК, триглецириды, калий, натрий, кальций, магний, железо, хлор.

Исследование на инфекционные заболевания. Кровь донорская после получения обязательно обследуется на инфекционные заболевания – на вирус чумы плотоядных, вирусный гепатит и др. Кровь на должна давать положительные реакции на любые инфекционные заболевания.

Затем, перед тем, как приступить к переливанию донорской крови, необходимо убедиться в ее пригодности к переливанию. Визуально проверяется герметичность упаковки, макроскопически оценивается качество донорской крови. Определять годность крови необходимо при достаточном освещении непосредственно на месте хранения, не допуская взбалтывания. Критериями годности для переливания являются: прозрачность плазмы, равномерность верхнего слоя эритроцитов, наличие четкой границы между эритроцитами и плазмой. При возможном бактериальном загрязнении цельной крови цвет плазмы будет тусклым, с серо-бурым оттенком, она теряет прозрачность, в ней появляются взвешенные частицы в виде хлопьев или пленок. Такая донорская кровь переливанию не подлежит.

Кроме того, показателем качества перелитой донорской крови является клиническое улучшение состояния реципиента, такие как увеличение объема циркулирующей крови, увеличение гематокрита реципиента, при коагулопатиях – уменьшение или исчезновение кровотечений, изменение цвета слизистых с бледных до розовых и слабо розовых, улучшение или появление аппетита и др.

Требования к качеству:

Клинически здоровые доноры

Макроскопическая оценка хранящейся крови, соответствующая норме.

Отсутствие бактериального заражения хранимой крови.

Соблюдение температурного режима хранения крови (+2 +4 С).

Не использования крови по истечению срока хранения (21 сутки).

Клиническое улучшение состояния реципиента в течение 1-2 суток после переливания донорской крови.

гормональная и Цитологическая оценка полового цикла.

Таблица. Половой цикл у сук

Под половым циклом понимают обычно весь комплекс процессов, протекающих в репродуктивной системе самки млекопитающих. После наступления половой зрелости в яичниках происходит интенсивное развитие фолликулов, причем рост и созревание идет волнообразно, что соответствует ритмике половых циклов данного животного.

Половой цикл можно условно разделить на два периода - покоя и половой активности, иногда именуемый в собаководстве «пустовка» . Период половой активности продолжается у сук 25 - 27 дней и подразделяется на три фазы: проэструс (предтечка), эструс (течка) и метэструс (диэструс, послетечка). Все они характеризуются определенными морфофизиологическими изменениями в репродуктивной системе и в поведении.

Цитологическое исследование влагалищных мазков

(Предполагаемый день овуляции, Код 303 ).

Исследование в Лаборатории «Шанс Био» - 30 мин.

Исследуемый материал: влагалищный мазок.

Взятие, хранение, доставка материала: мазок делается с помощью цервикального зонда (цитощетки), обязательно используя влагалищное зеркало. Зондом (цитощеткой) делается тонкий, монослойный мазок на стекло. Стекла сушаться на воздухе.

Обязательно приложить направление с указанием дня течки, последней вязки.

Важно при взятии мазка из влагалища использовать влагалищное зеркало для предотвращения попадания в материал эпителиальных клеток из преддверия и с кожи. Мазок делается цитощеткой для цервикальных мазков, затем равномерно распределяется по предметному стеклу.

Циклические изменения, происходящие во влагалище, дают возможность цитологической оценки сроков овуляции. Период половой активности отличается усиленным размножением клеток влагалищного эпителия, ороговением и отторжением его поверхностных слоев. Клеточные элементы, их количество и соотношение позволяют точно установить фазу полового цикла.

На момент овуляции отмечается ороговевание подавляющего числа клеток эпителия (более 80%) во влагалищном мазке.

Существует одно НО: это наблюдается только у 75% сук. Те есть, точность метода составляет 75%, что довольно много.

Гормональное исследование полового цикла.

Исследование в Лаборатории «Шанс Био» - до 10 дней.

Исследуемый материал: сыворотка крови.

Взятие: Натощак, обязательно перед проведением диагностических или лечебных процедур. Кровь берется в сухую, чистую пробирку (одноразовую) (пробирка с белой или красной крышкой) . Используют иглу с большим просветом (без шприца, исключения только при трудных венах). Кровь должна стекать по стенке пробирки. Плавно перемешать, плотно закрыть.

Хранение: Сыворотка или плазма должны быть отделены как можно быстрее (идеально отделять сразу после взятия, сыворотка замораживается)..

Хранится материал от 30 минут (при комн. температуре) до нескольких недель в замороженном виде (размораживать пробу можно только один раз).

Доставка: Доставить кровь следует в кротчайшие сроки в сумке-холодильнике. Замороженную сыворотку доставлять только на льду!!!

Прогестерон (К од 610)

Собаки, суки, фолликулиновая фаза - 1,0 – 10,0 нг/мл

Собаки, суки, лютеиновая фаза, метэструс 10,0 – 80,0 нг/мл

Собаки, суки, анэструс - менее 1,0 нг/мл

Уровень прогестерона начинает повышаться с фоновых значений за 2-4 дня до наступления эструса, и достигает пика к окончанию течки, после чего отмечается длительный постепенный спад в течение двух месяцев.

Уровень прогестерона не используется для диагностики беременности!

Эстрадиол (К од 602)

Референтные интервалы Лаборатории «Шанс Био»:

Собаки, суки, фолликулиновая фаза - 5,0 – 40,0 пг/мл

Собаки, суки, лютеиновая фаза 10,0 – 30,0 пг/мл

Собаки, суки, анэструс, метэструс - менее 8,0 пг/мл

Собаки, кобели - менее 25,0 пг/мл

Подъём уровня эстрадиола начинается за 4 недели до начала проэструса, что может дать команду владельцу животного к подготовке вязки. Пик эстрадиола приходится на начало эструса, после чего, следует длительный спад.

Лютеинизирующий гормон (ЛГ) (К од 607)

Референтные интервалы Лаборатории «Шанс Био»:

Собаки, суки, фолликулиновая фаза - 1,8 – 15,0 МЕ/л

Собаки, суки, лютеиновая фаза 0,6 – 15,0 МЕ/л

Фаза лютеинизации у собак начинается, в отличие от людей, до овуляции. Пик активности ЛГ приходится на начало эструса, а собственно, активность, продолжается два - четыре дня, после чего, уровень ЛГ опять опускается до фоновых значений.

фолликулостимулирующий гормон (ФСГ) (К од 608)

Референтные интервалы Лаборатории «Шанс Био»:

Собаки, суки, фолликулиновая фаза - 2,4 – 10,0 МЕ/л

Собаки, суки, лютеиновая фаза 0,01 – 6,4 МЕ/л

ФСГ стимулирует секрецию эстрогенов, рости и созревание фолликулов.

Повышение ФСГ может свидетельствовать о функциональной недостаточности яичников, первичном гипогонадизме.

Понижение – гиперэстрогенемия, вторичный гипогонадизм, нарушение полового цикла и бесплодие.